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人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷 NK-92

簡(jiǎn)要描述:NK-92MI人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細(xì)胞
上海復(fù)祥生物提供 ATCC 細(xì)胞|細(xì)胞系|細(xì)胞株|腫瘤細(xì)胞|細(xì)胞|貼壁細(xì)胞|懸浮細(xì)胞|,細(xì)胞庫(kù)管理規(guī)范,提供的細(xì)胞株背景清楚,提供參考文獻(xiàn)和培養(yǎng)條件,網(wǎng)站上有細(xì)胞照片,歡迎各位老師咨詢!

  • 產(chǎn)品型號(hào):
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時(shí)間:2025-07-08
  • 訪  問  量:3418

詳細(xì)介紹



形態(tài)特性聚團(tuán)生長(zhǎng)特性懸浮特征特性NK-92細(xì)胞是從一位患有急進(jìn)性非霍奇金淋巴瘤的50歲白人男性外周血單核細(xì)胞衍生來的一株IL-2依賴型NK細(xì)胞株。NK-92MI細(xì)胞是轉(zhuǎn)染得到的源自NK-92細(xì)胞的IL-2非依賴的NK細(xì)胞株。親本細(xì)胞NK-92通過微粒體基因轉(zhuǎn)化法用逆轉(zhuǎn)錄病毒MFG-hIL-2載體攜帶的人IL-2cDNA進(jìn)行轉(zhuǎn)化。可能由于載體整合到基因組DNA中,轉(zhuǎn)化是穩(wěn)定的。這株細(xì)胞對(duì)很多惡性細(xì)胞有細(xì)胞毒性;鉻釋放試驗(yàn)顯示它能殺死K562細(xì)胞和Daudi細(xì)胞。NK-92細(xì)胞有以下特征:CD2、CD7、CD11a、CD28、CD45、CD54表面標(biāo)記陽性;CD1、CD3、CD4、CD5、CD8、CD10、CD14、CD16、CD19、CD20、CD23、CD34和HLA-DR表面標(biāo)記陰性。其親本IL-2依賴的細(xì)胞株NK-92細(xì)胞及另一株同樣來源于NK-92細(xì)胞株的IL-2非依賴的細(xì)胞株NK-92CI都可從ATCC得到。NK-92MI細(xì)胞和NK-92CI細(xì)胞這兩個(gè)變種都包含、表達(dá)并合成hIL-2cDNA。NK-92MI細(xì)胞合成的IL-2水平比NK-92CI高,而親本細(xì)胞不合成表達(dá)。1998年9月提交到ATCC的培養(yǎng)物污染了支原體,其后代通過BM細(xì)胞周期蛋白處理21天消除支原體。處理后6周,用Hoechst染色、PCR和標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)測(cè)試進(jìn)行支原體檢測(cè),結(jié)果都呈陰性。培養(yǎng)條件MEMα+0.2mM Inositol+0.1mM β-mercaptoethanol+0.02mM Folic Acid+12.5% HS+12.5% FBS傳代方法1:2凍存條件無血清凍存液



產(chǎn)品名稱人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細(xì)胞;NK-92 (STR)
品牌FuXiang
英文名NK-92 (STR)
貨號(hào)XF1204
規(guī)格1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)75%MEMα(成分:含2mML谷gu氨酰胺,1.5g/L碳tan酸氫鈉,不含核糖核苷酸和脫氧核糖核苷酸),+12.5%熱滅活馬血清+12.5%進(jìn)口胎牛+1%雙抗+0.2mM肌醇+0.02mM葉ye酸+0.1mM β-Mer+200U/ml IL-2
別稱NK92; Natural Killer-92; NK-92.05; Neukoplast; aNK
形態(tài)特征圓形
生長(zhǎng)特性懸浮
培養(yǎng)基NK-92專用培養(yǎng)基
培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5%溫度:37℃
傳代方法1:2傳代
特別聲明復(fù)祥細(xì)胞庫(kù)承諾盡最大努力對(duì)實(shí)驗(yàn)細(xì)胞資源相關(guān)信息進(jìn)行及時(shí)更新。但限于當(dāng)時(shí)的技術(shù)條件,細(xì)胞庫(kù)資料不保證其準(zhǔn)確性。





產(chǎn)品名稱NK-92專用培養(yǎng)基
英文名NK-92 Specific Medium
規(guī)格500ml
產(chǎn)品形態(tài)液體
培養(yǎng)基成分75%MEMα(成分:含2mML谷gu氨酰胺,1.5g/L碳tan酸氫鈉,不含核糖核苷酸和脫氧核糖核苷酸),+12.5%熱滅活馬血清+12.5%進(jìn)口胎牛+1%雙抗+0.2mM肌醇+0.02mM葉ye酸+0.1mM β-Mer+200U/ml IL-2
支原體檢測(cè)陰性
細(xì)胞生長(zhǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)良好,形態(tài)正常
儲(chǔ)存條件2~8℃,避光儲(chǔ)存
運(yùn)輸條件冰袋發(fā)貨
有效期3個(gè)月




常溫細(xì)胞收貨后處理方法

1. 收到細(xì)胞后,首先觀察培養(yǎng)瓶是否完好,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶有破裂,培養(yǎng)基外溢、渾濁等現(xiàn)象,請(qǐng)及時(shí)拍照并與我們聯(lián)系。

2. 75%酒精對(duì)培養(yǎng)瓶表面進(jìn)行消毒處理,將培養(yǎng)瓶置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)2~4 h,以恢復(fù)細(xì)胞狀態(tài)。

3. 靜置完成后,取出培養(yǎng)瓶,顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存(40×,100×,200×各一張)前三天照片為重要售后依據(jù)。如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞異常請(qǐng)及時(shí)與我們聯(lián)系,如果細(xì)胞簽收三天內(nèi)未與我們聯(lián)系,則默認(rèn)為收貨良好。

4. 若細(xì)胞密度超過80%,則可以根據(jù)提供的細(xì)胞培養(yǎng)步驟進(jìn)行傳代或凍存;若細(xì)胞密度未達(dá)到80%,收集瓶中完quan培養(yǎng)基,留6mL培養(yǎng)基,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。

凍存細(xì)胞收貨后處理方法

1. 收到細(xì)胞后,首先觀察泡沫箱中干冰是否有剩余,凍存管是否完好,是否有解凍情況,若發(fā)現(xiàn)干冰完quan汽化或凍存管有解凍現(xiàn)象,請(qǐng)及時(shí)拍照并與我們聯(lián)系。如果細(xì)胞簽收三天內(nèi)未與我們聯(lián)系,則默認(rèn)為收貨良好。

2. 復(fù)蘇第一管如有活性、狀態(tài)問題及時(shí)與我們聯(lián)系,會(huì)有技術(shù)人員與您溝通指導(dǎo)后再?gòu)?fù)蘇第 二管。

特別說明:未與我方聯(lián)系,擅自復(fù)蘇第二管出現(xiàn)問題不予售后。

 

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

1. 復(fù)蘇細(xì)胞:從液氮灌中或-80冰箱中查找到需要復(fù)蘇的細(xì)胞,水浴鍋提前打開預(yù)熱37

1) 將查找到的凍存細(xì)胞在37℃水浴中迅速搖晃解凍;

2) 將凍存管中的細(xì)胞移至含 5ml quan培養(yǎng)基的離心管中,1000rpm 離心 5min;

3) 棄去上清液,補(bǔ)加4-6mLquan培養(yǎng)基后吹勻,接種于T25培養(yǎng)瓶中(或6cm皿中),培養(yǎng)過夜,第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2. 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1) 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次;

2) 1-2mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化3-5min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后,5ml以上含10%血清的完quan培養(yǎng)基終止消化;

3) 輕輕吹打細(xì)胞,完quan脫落后吸出至離心管中,1000rpm離心5-8min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mLquan培養(yǎng)基后吹勻;

4) 5-6mL/瓶補(bǔ)加完quan培養(yǎng)基,將細(xì)胞懸液按1:21:3的比例分到新的含5-6 mLquan培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中或者培養(yǎng)瓶中。

1個(gè)T25傳代接種至2~3個(gè)T25或者2~3個(gè)直徑為6cm的培養(yǎng)皿

3. 細(xì)胞凍存:細(xì)胞收集參照傳代步驟1~2,按凍存數(shù)量加入無血清凍存液后直接放-80℃冰箱過夜,后續(xù)可轉(zhuǎn)入液氮罐中長(zhǎng)期保存。

關(guān)于細(xì)胞株售后服務(wù)

一、細(xì)胞出現(xiàn)問題,可重發(fā)的情況有哪些?判定標(biāo)準(zhǔn)是什么?

1. 細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題,細(xì)胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等,重發(fā);

2. 細(xì)胞污染問題,請(qǐng)?jiān)谑盏疆a(chǎn)品48小時(shí)內(nèi),給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,核實(shí)后重發(fā);

3. 常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置24小時(shí)后,干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇后24小時(shí)后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,(需提供真實(shí)清晰的細(xì)胞狀態(tài)照片),重發(fā);

4. 干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇后24小時(shí)后或常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置4小時(shí)候并且未開封,出現(xiàn)污染,重發(fā);

5. 細(xì)胞活性問題,請(qǐng)?jiān)谑盏疆a(chǎn)品7天內(nèi)給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,核實(shí)后予重發(fā);

6. 細(xì)胞收到當(dāng)天以及第23天請(qǐng)拍照,3天未告知的,視為產(chǎn)品合格。4-7天內(nèi)出現(xiàn)問題有提供收到細(xì)胞前3天照片和細(xì)胞出現(xiàn)問題時(shí)照片以及細(xì)胞相關(guān)操作的詳細(xì)步驟的,并跟技術(shù)人員溝通的,由技術(shù)人員判定為我方責(zé)任的,重發(fā)。技術(shù)人員判定為雙方承擔(dān)責(zé)任的由雙方進(jìn)行協(xié)商處理或者按合同價(jià)的50%收費(fèi)重發(fā)。

二、細(xì)胞出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?

1. 客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā);

2. 客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);

3. 非本庫(kù)推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);

4. 細(xì)胞狀態(tài)不好,未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);

5. 細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的,不重發(fā);

6. 細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);

7. 視具體情況而定。

 

 

 



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